英语原文共 8 页，剩余内容已隐藏，支付完成后下载完整资料
gamma;-环糊精与增溶剂对复方杜他菊酯软胶囊（Avodartreg;）生物等效性影响
摘要：本研究旨在提高已经上市的药剂复方杜他菊酯软胶囊（Avodartreg;）的生物利用度。研究环糊精在配方经过溶解聚合物与表面活性剂优化后提高杜他菊酯溶解性。在环糊精的实验中，gamma;-环糊精与杜他菊酯混合具有最高的溶解性。加入聚乙烯吡咯烷酮，月桂酸聚乙二醇甘油酯与维生素E聚乙二醇琥珀酸酯能够进一步提高杜他菊酯的溶解性。利用差示扫描量热与X射线衍射研究表明，杜他菊酯以非晶体的形式存在于复合物中。利用大鼠动力学实验筛选出的杜他菊酯复合物，利用直接压片法制备胶囊剂。杜他菊酯复合物片的体外溶出度曲线与参考值相似。然而在让比格犬口服药物实验发现，药动学参数Cmax和AUC并不同于对照组的生物利用度92.4%。这些实验展示在杜他菊酯与环糊精的复合物基础上加入增溶剂和表面活性剂开发片剂的可行性。
关键词：杜他菊酯、胶囊剂、环糊精、复方
1、介绍
杜他菊酯是竞争性alpha;-氧化酶Ⅰ、Ⅱ5阻断剂，用于治疗良性前列腺增生与脱发。研究表明，杜他菊酯可以减少婴儿的前列腺与肾上腺重量，增加婴儿卵巢或者睾丸的质量。它被FDA分为孕妇目录X，因此孕妇或者可能成为孕妇的女性应避免使用杜他菊酯。
杜他菊酯在生物药剂分类系统里被分为二类，由于其低溶解性目前上市的只有软胶囊制剂。然而，在高温条件下，胶囊壳的物理强度较弱，容易出现裂痕或者胶囊变形。此外有效成分能够迁移到明胶壳中。因为杜他菊酯容易经皮吸收，这些因素将导致健康问题。故开发杜他菊酯片剂可以提高药物的安全性。患者对更小的固体片剂的顺从性高于软胶囊。同时杜他菊酯经常与诸如坦索罗辛等治疗BPH药物同时服用，复方固体制剂更方便定剂量与其他药物搭配。
已有的对杜他菊酯溶解性的研究方向主要为适合制备软胶囊研究的自乳化释药系统。即通过药物与环糊精结合增加憎水药物溶解性与解离率，提高生物利用率。由于药物与环糊精复合物不形成共价键，因此复合物可以在水溶液中轻松分离。包括聚合物、有机盐、和缓冲络合物在内的多种因素层被尝试用来进一步增加复合物的溶解性。通过加入水溶聚合物可以增加复合物的水溶性同时降低环糊精的使用量。但复合物中水溶性络合物可以与复合物形成稳定的微球或其他类型的聚合物。这可以在不减少复合能力的情况下增加环糊精的水溶性。传统上，药物聚合物如甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮通过在生长晶体周围形成聚合物网络来防止药物成核和晶体生长。因此，它们的加入导致药物结晶的减少，并对环糊精的增溶作用产生协同作用。
我们假设表面活性剂的加入将进一步增强与药物环糊精络合物分离的游离药物的增溶作用。研究的目标是探究加入多种聚合物与表面活性剂优化后进一步提高杜他菊酯复合物溶解与解离。在薄膜包衣片剂配方确定后后，将其在比格犬体内的药代动力学与Avodartreg;软胶囊进行比较。
2.材料与方法
2.1制备材料
杜他菊酯从孟买的Cipla公司购买，alpha;-环糊精（alpha;-CD）、beta;-环糊精（beta;-CD）、gamma;-环糊精（gamma;-CD）和羟丙基-beta;-环糊精（HP-beta;-CD）购自慕尼黑的Wacker Chemie AG公司。聚乙烯吡咯烷酮K30（PVP）购自德国巴斯夫公司、D-alpha;-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯（TPGS）购自法国Isochem公司、硬脂酰聚氧乙烯甘油酯（Gelucire 50/13）购自法国盖特弗索公司、聚乙二醇（PEG400）由日本雅库里纯化工购买和聚环氧乙烷-聚丙烯氧化物共聚物（Poloxamer 407）从德国巴斯夫购买，这些被用作增溶剂。乳糖（SuperTab 11SD）（DFE pharma，日本）、微晶纤维素（Avicel PH102）（FMC，美国）、交联聚维酮（Polypolasone XL）（Ashland，荷兰）、硬脂酸镁（Faci，意大利）、Opadryreg;（Colorcon，新加坡）和乙基纤维素（Ethocel 10）（Colorcon，韩国）用作片剂的辅料。Avodartreg;软胶囊（英国葛兰素史克公司）是从本地一家药店购买的。
2.2制备杜他菊酯-环糊精复合物研究
杜他菊酯的-环糊精配合物用烘箱干燥法制备。即首先将杜他菊酯按2mg/ml比例溶解到的乙醇中。将不同类型的环糊精（alpha;-CD，beta;-CD，gamma;-CD，HP-beta;-CD）分别溶解的蒸馏水中，配成100mg/ml溶液，两者以1:1的体积比均匀混合，然后在60度的烘箱中干燥，在1:50比重下测定杜他菊酯与不同环糊精复合物的水溶性。干燥的杜他菊酯环糊精配合物（相当于约0.5mg杜他菊酯）分散在1.0ml的蒸馏水中。缓慢搅拌1h后，通过过滤去除未溶解的杜他菊酯，然后用乙酰三醇和水的混合物（60/40，v/v）进行适当稀释。采用高效液相色谱法，柱条件：反相C18柱（Zorbax SB-苯基，150 mmtimes;3 mm，3.5 um，安捷伦），并利用紫外检测器在240 nm对杜他菊酯进行了含量测定。流动相为乙腈和水（55/45，v/v）的混合物，流速为0.5ml/min，进样量为50mu;l。
因为gamma;-CD配合物的溶解度最高，因此在不同重量比（1:10-1:70）下制备了杜他菊酯与gamma;-环糊精的配合物，以优化杜他菊酯的溶解度。其次，将0.4或1.0倍重量的聚合物和/或表面活性剂作为增溶助剂加入到杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物中，以进一步提高杜他菊酯的水溶性。如上所述过滤后测定杜他菊酯与gamma;-环糊精配合物和复合物溶液中的水溶性。
2.3利用大鼠研究口服后的药代动力学
给大鼠口服不同复合物口服给药，研究杜他菊酯在大鼠体内的药代动力学并与参比物进行比较。动物研究得到了华宁制药公司动物伦理委员会的批准。采用购自DBL有限公司的雄性Sprague-Dawley大鼠（8周龄，230-270g）。所有大鼠在实验前喂养1周使其熟悉环境，随机分为4-6组。实验前12小时，大鼠禁食。用聚乙烯管PE-50插管颈动脉，用异氟烷麻醉。每组动物经口灌胃给予参比药物或杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物，剂量为2.39 mg/kg的杜他菊酯，每只大鼠经口给予10 ml/kg的蒸馏水。在给药后0、0.5、1、2、4、8和24小时，从颈动脉采集血样（约0.3ml）。血浆在13000转/分的转速下离心5分钟，并在-70°C下保存。
如前所述，使用LC/MS/MS分析血浆样品中杜他菊酯的浓度。简单地说，将100mu;l血浆样品与900mu;l含非那雄胺（10 ng/ml）的乙腈溶液旋涡混合，并以13000 rpm离心，作为内标物。接着，在LC/MS/MS系统中注入5mu;l悬浮剂。LC分离由Acquity H级UPLC进行，质谱检测由TQ检测器使用MRM进行。采用涡轮电喷雾正电离界面。补充表S1总结了LC和质谱仪的主要工作参数。使用WinNonlinreg;分析杜他菊酯的药代动力学参数（Tmax、Cmax和AUC0–24小时）。6.2，Pharsight）基于线性梯形规则。杜他菊酯-gamma;-环糊精配合物的相对生物利用度计算如下：
2.4杜他菊酯与gamma;-环糊精配合物的表征
用场发射扫描电子显微镜（FESEM）（JSM-6700F，JEOL，Japan）在5kv加速电压下观察表面形貌。将样品铺在碳标签（双胶粘碳涂层胶带）上，贴在铝桩上，然后在铝桩上涂上一薄层铂。用差示扫描法对杜他菊酯与gamma;-环糊精复合物和杜他菊酯-gamma;-环糊精配合物热量计（dsc200f3mala，耐驰）进行了热分析。在20-280°C的温度范围内，以10°C/min的升温速率在铝盘中进行分析。使用XRD Ultima III（Rigaku）对样品进行X射线衍射（pXRD）分析。测量条件为：扫描速度3°/min，步长0.02°。用Nicolet红外光谱仪（iS50，Thermo，USA）进行FTIR观察。
2.5杜他菊酯片的制备
采用压片法制备杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物片剂。简单地说，杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物是乳糖和微晶纤维素的混合物，用流化床造粒机造粒。配方设计每片（总重量240毫克）含0.5毫克杜他菊酯。压片前测量颗粒的Carr指数为18，表明流动性良好。用8.5mm圆形冲头在旋转压片机上压片，压片硬度在12～13kp之间。接下来，用HPMC基Opadry薄膜包裹片剂。3%重量包衣（直径8.5 mm，厚度4.2 mm，圆形）后，薄膜包衣片的尺寸比市场上销售的Avodartreg;软胶囊（长度19mm，厚度6.7 mm，棒状）小。
2.6杜他菊酯片溶出度试验
采用USP溶出度法（Tier I和Tier II）对杜他菊酯从杜他菊酯与gamma;-环糊精复合片中的体外溶出度进行评价，并与对照品（Avodartreg;）进行比较。在Tier I方法中，使用仪器测量杜他菊酯的溶解速率，其中溶解介质为900 ml 0.1 N HCl溶液和2%（w/v）十二烷基硫酸钠，在37℃下，并以50 rpm搅拌。在Tier II法中，前25分钟的溶出介质为450毫升0.1 N HCl溶液和胃蛋白酶（1.6 g/l，标记活性为1:3000），然后添加450毫升0.1 N HCl溶液和SLS（4%，w/v），用于剩余的溶出试验。按固定时间间隔获得样品（5 ml），并在通过0.45mu;m PVDF过滤器过滤后，使用如上所述的紫外检测器通过HPLC进行分析。
2.7杜他菊酯片在比格犬中的药代动力学研究
通过让比格犬口服杜他菊酯-gamma;-环糊精复合片或参比物，对杜他菊酯进行体内交叉药代动力学研究。动物研究得到了韩国动物医学科学研究所机构动物护理和使用委员会的批准。实验前6只雄性比格犬（10公斤，10个月大）禁食过夜。每只狗服用一粒参比胶囊（Avodart，相当于0.5毫克杜他菊酯）或一片。杜他菊酯-gamma;-环糊精配合物（F5）（相当于0.5毫克杜他菊酯），然后服用10毫升水。在给药后0、0.5、1、2、4、8、12、24和48小时，从头静脉采集血样并收集（3ml）到肝素化管中。用3000转/分的速度离心样品5分钟获得血浆，并在-70°C下保存。两次实验间的清洗期为4周。血浆样品处理和LC/MS/MS分析条件与上述大鼠研究相同。根据实验数据确定Cmax和Tmax。用线性梯形法计算出了从时间零点到最后一个浓度时间点（AUC0-t）血浆浓度时间分布下的面积。数据用t检测验证。当Plt;0.05时有意义。所有数据用平均
3.结果及讨论
3.1环糊精对杜他菊酯水溶性的影响
表1显示了杜他菊酯与各种环糊精以1:50重量比络合时的水溶性，以及通过计算机对接模拟工具Glide获得的它们的结合亲和力。在被测环糊精中，gamma;-环糊精络合物的水溶性最高，结合亲和力最低，表明络合物形成稳定。制备不同比重（1:10-1:70）的杜他菊酯-gamma;-环糊精配合物，并测定杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物的水溶性。杜他菊酯-gamma;-环糊的水溶性不断增加直至1:70比重（表2），因此选择该值进行进一步评估。值得注意的是，随着以0.4比重的增溶聚合物（即PVP和PEG）和表面活性剂（即Gelu-cire、TPGS和泊洛沙姆）添加到杜他菊酯-gamma;-环糊精络合物（杜他菊酯：gamma;-环糊精=1:70）中，杜他菊酯的溶解度协同增加（表3）。PVP与凝胶剂的质量比为0.4时，杜他菊酯-gamma;-环糊精的最高溶解度为147mu;g/ml，是杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物（1:70）（93mu;g/ml）溶解度的1.5倍。在先前的研究中，当杜他菊酯与HP-beta;-CD和HPMC以1:26.6:13.3的重量比复合时，杜他菊酯的最高溶解度仅为47.1mu;g/ml。此外，本研究采用超临界流体制备方法制备复合物，该方法对环境友好，但在制药企业中没有广泛应用。因此，值得注意的是，通过简单干燥法制备的杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物的水溶性比报道的水溶性高。
在初步溶解度研究的基础上，通过改变杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物中杜他菊酯-gamma;-环糊精（1:10-1:70）与表面活性剂的比重，进一步优化了杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物。表4显示了为进一步评估而选择的杜他菊酯-gamma;-环糊精配合物的组成和杜他菊酯的水溶性。当选择0.4比重的PVP作为增溶聚合物时，随着表面活性剂（凝胶剂：TPGS=1:1）含量比重增加到2（F5），杜他菊酯的溶解度增加到170mu;g/ml。这些结果与先前的报道一致，即水溶性聚合物的加入通过防止药物成核和/或晶体生长协同增强环糊精的增溶作用。此外，表面活性剂进一步增加了杜他菊酯的溶解度，这支持了我们的假设，即表面活性剂将通过溶解从药物环糊精络合物中分离出来的游离药物而进一步提高药物的溶解度。
3.2大鼠杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物大鼠药动学研究
大鼠口服2.39mg/kg剂量的Avodartreg;或杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物后，杜他菊酯的血浆浓度分布如图1所示，药代动力学参数如表5所示。杜他菊酯-gamma;-环糊精复合物（F1）分别与gamma;-环糊精和表面活性剂的比重为10和0.4，相对BA含量仅为29.6%。然而，当gamma;-环糊精的重量比分别增加到30和50（F2和F3）时，杜他菊酯的相对BA增加到参考值的74%。此外，以2（F4和F5）的重量比添加表面活性剂进一步增加了相对BA，达到参考值的93.6%。
对于包括杜他菊酯在内的BCS II类药物，通过提高药物在胃肠道中的溶出度来提高其口服生物利用度是最实际的策略。随着杜他菊酯的，通过增加gamma;-环糊精重量和添加表面活性剂增加溶解度（表4），杜他菊酯的相对BA成比例增加（表5）。除了gamma;-环糊精的增溶作用外，表面活性剂还通过抑制预循环
剩余内容已隐藏，支付完成后下载完整资料
资料编号：[234876]，资料为PDF文档或Word文档，PDF文档可免费转换为Word
以上是毕业论文外文翻译，课题毕业论文、任务书、文献综述、开题报告、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
